Modèles d’AVC ischémique distal :

Approches communes : tous nos modèles expérimentaux d’AVC ischémique lacunaire sont réalisés chez des souris avec un protocole chirurgical présentant une base commune. L’ischémie cérébrale est induite par une approche externe (craniotomie) de l’artère cérébrale moyenne (MCA) au carrefour entre les segments M2 et M3. Ensuite, un protocole de thrombose spécifique est effectué en fonction du modèle choisi. La formation de caillots est contrôlée à l’aide d’un enregistrement Laser Doppler. Quel que soit le modèle choisi, les lésions induites sont limitées au cortex cérébral avec un taux de mortalité très faible (<1%).

Fig. 1 : histologie des thrombis induits soit avec A) de la thrombine, soit avec B) du FeCl₃. Les caillots générés avec la thrombine contiennent plus de fibrine et moins de plaquettes que ceux produits avec FeCl₃. Légende : La fibrine (rouge), les plaquettes (vert) et DAPI (bleu).

Fig. 2: Mesure de la reperfusion du cortex cérébral après fibrinolyse au rtPA par une analyse Laser speckle dans le modèle de caillots riches en fibrine chez la souris. La ligne pointillée montre la zone ischémiée.

Fig. 3 : Modèle de caillot riche en fibrine chez la souris : effets de la fibrinolyse au rtPA précoce (20 min) ou tardive (4h) sur A) Score angiographique à 3h, 6h ou 24h après l’apparition de l’AVC (ARM-TOF), B) indice de perfusion mesuré 20 min ou 24h après l’apparition de l’AVC (IRM pondérée de perfusion (PWI)) et C) taille de la lésion 24h après l’apparition de l’AVC (IRM pondérée T2). * p < 0.05. Données exprimées en moyenne ± ESM.

Adapted de Orset et al., Neuromethods, 2016, 120:59-68.

Ischémie permanente

• Électrocoagulation et section de la MCA
• Modèle sans reperfusion

Fig. 4 : exemple de résultat obtenu avec un modèle d’ischémie permanente chez la souris pour évaluer les effets des anticorps anti-CD49d sur l’infiltration des leucocytes. Résultats obtenus 7 jours après l’AVC : A) distribution superposée CD45⁺ leucocyte hors de la zone centrale de l’infarctus, B) numération des leucocytes CD45⁺ dans les hémisphères ipsilatéral (ip) et controlatéral (con). Données exprimées en moyenne ± ESM. IgG: anticorps témoins.

 Adapté de Llovera et al., Science Translationnal Medicine, 2015, 7:299ra121. 

Accident ischémique transitoire (AIT)

• Pression mécanique sur MCA à l’aide d’une pipette émoussée
• Durée d’occlusion contrôlée avec précision
• Cinétique de l’aspect de la lésion caractérisée
• La courte durée de l’ischémie (< 15 min) mime l’AIT

Fig. 5: Volume de l’infarctus cérébral après occlusion de la MCA pour des durées comprises entre 5 secondes et 90 minutes. Une occlusion de 15 minutes reproduit les caractéristiques de l’AIT. n = 10 par groupe. *P<0.05, **P<0.01 et ***P<0.001 par rapport au groupe pseudo-opéré. Données exprimées en moyenne ± SEM. pMCAO: occlusion permanente.

Adapté de Orset et al., Neuromethods, 2016, 120:59-68.

Modèles d’AVC ischémique proximal

Fig. 1 : Effets de l’altéplase (i.v. 2h après l’AVC) sur le score de déficit neurologique (A) et le volume de la lésion (B) 24h après l’AVC thromboembolique induit par 5 ou 9 caillots chez le rat. La résistance à l’altéplase est obtenue avec 9 caillots. *P<0.05 par rapport au véhicule. Données exprimées en moyenne ± SEM. Données de validation interne.

Fig. 2 : Coupe représentative obtenue avec des modèles de course distale colorée au TTC. Le tissu cérébral infarci ne se colore pas en rouge.

Modèle FAST chez la souris : faire face à la variabilité clinique

• STROK@LLIANCE propose une stratégie unique visant à vérifier la performance de votre médicament candidat dans une situation reproduisant la variabilité d’un essai clinique

Chez l’Homme, les essais cliniques sont caractérisés par une grande variabilité de l’évolution des déficits observés chez les patients victimes d’un AVC ; Les déficits sont généralement évalués 90 jours post AVC à l’aide d’échelles telles que NIHSS ou le score de Rankin. L’étude de référence NINDS (NINDS, N Engl J Med,1995, 333: 1581-1588) a rapporté que 20% des patients avaient une déficience mineure ou nulle 3 mois après l’AVC, 27% des patients présentaient des symptômes modérés à sévères, tandis que 21% étaient décédés. Dans ce contexte, l’Altéplase modifie positivement la réparation des patients dans chacune des différentes catégories (Fig. 1).

Fig. 1 : Effets de l’altéplase (rt-PA) sur les résultats 3 mois après l’AVC.

Loin de la situation bien reproductible et contrôlée du laboratoire, la variabilité clinique remet en question la prédictivité des essais précliniques. STROK@LLIANCE propose une stratégie unique visant à vérifier les performances de votre médicament candidat avec la variabilité des situations cliniques.

• Modèle FAST chez la souris : faire face à la variabilité clinique
  • Formation périphérique de caillot induit par FeCl₃ sur la carotide commune
  • Massage artériel pour provoquer une thrombo-embolie
  • La variabilité des patients NIHSS arrivant en urgence est reproduite chez la souris
  • La procédure expérimentale permet l’induction de l’AVC chez de nombreux animaux en peu de temps. La taille des groupes assure une puissance statistique suffisante.